首先,我們來(lái)了解一下登革熱及登革熱病毒。
登革熱的病原是登革熱病毒(Dengue virus;DENV),屬黃病毒科黃病毒屬。已知有 4 種不同的血清型(登革熱病毒Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ)。登革熱的潛伏期一般為3~15天,多數(shù)5~8天。由于目前沒(méi)有一種有效疫苗來(lái)預(yù)防登革熱,也沒(méi)有特效治療方法,若重復(fù)感染不同型別的登革熱病毒,可能造成癥狀嚴(yán)重的出血性登革熱(如消化道大出血等),其惡性度高,嚴(yán)重時(shí)可致人死亡。
登革熱以伊蚊為媒介傳播,典型癥狀包括持續(xù)發(fā)熱、頭痛、肌肉痛、關(guān)節(jié)痛等。主要發(fā)生在熱帶和亞熱帶地區(qū),比如今年的東南亞多地如菲律賓、泰國(guó)、越南和緬甸都發(fā)生過(guò)登革熱疫情。多發(fā)于夏秋季(高峰在7~9月),2014年秋我國(guó)的廣東省曾出現(xiàn)登革熱疫情,今年9月5日至9月13日,海南省已報(bào)告登革熱病例105例。
國(guó)慶將至,我們必須提醒大家前往登革熱高發(fā)國(guó)家和城市旅游時(shí),需提高自我保護(hù)意識(shí),做好防蚊、個(gè)人保護(hù)措施。
那么發(fā)現(xiàn)有高熱、頭痛等癥狀,如何鑒別是否感染了登革熱病毒呢?
且看以下幾種方法~
1、使用血清學(xué)方法時(shí),黃熱病毒屬,特別是登革熱病毒的血清型之間有嚴(yán)重的交叉反應(yīng)。并且在登革熱病毒二次感染時(shí),由于多種黃病毒都被計(jì)算在內(nèi),使用血清學(xué)方法來(lái)確認(rèn)正在感染的登革熱病毒往往是不可能的。
2、
細(xì)胞培養(yǎng)分離病毒是檢測(cè)病毒的金標(biāo)準(zhǔn),但有局限性。
(1)、細(xì)胞培養(yǎng)病毒分離的檢測(cè)窗口只有一至兩天,機(jī)會(huì)稍縱即逝。
(2)、抗體的增加會(huì)感染病毒分離。
(3)、基于生物安全的考慮,采用細(xì)胞培養(yǎng)病毒分離的方法對(duì)實(shí)驗(yàn)室的要求特別高,很多實(shí)驗(yàn)室達(dá)不到標(biāo)準(zhǔn)無(wú)法開(kāi)展檢測(cè)工作。
3、目前,蕞可靠和準(zhǔn)確的方法是基于PCR技術(shù),特別是熒光定量PCR方法,它可以比病毒分離和抗體實(shí)驗(yàn)更快更靈敏地獲得結(jié)果。
為了有效篩查登革熱感染人員,盡快檢測(cè)和確診以加速治療,減輕病人的痛苦,朗基科儀蕞新優(yōu)化出一套快速、準(zhǔn)確檢測(cè)登革熱病毒的整體解決方案。作為國(guó)內(nèi)當(dāng)先的生命科學(xué)儀器設(shè)備等解決方案的高科技企業(yè),杭州朗基科儀責(zé)無(wú)旁貸。
qPCR檢測(cè)登革熱病毒的金方案
1、樣品前處理&核酸提取方案
按相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)要求采集樣品(全血、血清等)。短期樣品可存放在-20℃,長(zhǎng)期保存可存放于-80℃(不能超過(guò)6個(gè)月)。按病毒RNA提取試劑盒說(shuō)明書(shū)處理樣品并提取核酸,根據(jù)需要可配備核酸提取儀。
2、準(zhǔn)確&快速的檢測(cè)平臺(tái)
根據(jù)日常待檢樣品的數(shù)量,用戶(hù)可選擇便攜式熒光定量PCR儀【Q160型】、快速熒光定量PCR系統(tǒng)【Q1000+型】,或者高通量熒光定量PCR系統(tǒng)【Q2000C型】。
Q160型
16孔雙通道設(shè)計(jì),適合小型機(jī)構(gòu)。
無(wú)需電腦、直出結(jié)果。
所有樣品孔熒光檢測(cè)同時(shí)進(jìn)行,
無(wú)邊緣效應(yīng)。
光學(xué)系統(tǒng)固態(tài)設(shè)計(jì),無(wú)運(yùn)動(dòng)部件。
設(shè)計(jì)精巧,審美在線,便于攜帶。
Q1000+型
最快變溫速率可達(dá)7度/秒,
48孔4通道,所有樣品同時(shí)檢測(cè),
大大縮短檢測(cè)時(shí)間。
專(zhuān)門(mén)為各類(lèi)病毒檢測(cè)開(kāi)發(fā)的陰陽(yáng)性判定和直出報(bào)告功能,
讓用戶(hù)檢測(cè)后無(wú)需再手動(dòng)整理檢測(cè)結(jié)果。
Q2000C型
96孔多通道設(shè)計(jì)( 最多可達(dá)6通道 )。
專(zhuān)利技術(shù),短光程靜態(tài)(SSLP)
熒光CCD成像技術(shù)。
滿(mǎn)足一次篩查大量樣品和多種病毒的要求。
屏幕角度可自由調(diào)節(jié)。
3、與進(jìn)口媲美的耗材
我們特別定制高品質(zhì)的白色反應(yīng)管來(lái)保證檢測(cè)結(jié)果的靈敏度和一致性,白管可屏蔽背景干擾,可獲得比透管更佳的檢測(cè)效果(見(jiàn)下圖)。
實(shí)驗(yàn)效果圖
4、檢測(cè)登革熱病毒的儀器
便攜式熒光定量PCR儀Q160型 | 杭州朗基科學(xué)儀器有限公司 |
快速熒光定量PCR系統(tǒng)Q1000+型 | 杭州朗基科學(xué)儀器有限公司 |
高通量熒光定量PCR系統(tǒng)Q2000C型 | 杭州朗基科學(xué)儀器有限公司 |
病毒RNA提取試劑盒 | 北京億森寶生物科技有限公司(科研用) |
登革熱病毒通用單重?zé)晒釶CR檢測(cè)試劑盒 登革熱病毒Ⅰ型單重?zé)晒釶CR檢測(cè)試劑盒 登革熱病毒Ⅱ型單重?zé)晒釶CR檢測(cè)試劑盒 登革熱病毒Ⅲ型單重?zé)晒釶CR檢測(cè)試劑盒 登革熱病毒Ⅳ型單重?zé)晒釶CR檢測(cè)試劑盒 登革熱Ⅰ/Ⅱ/Ⅲ/Ⅳ病毒 四重?zé)晒釶CR檢測(cè)試劑盒 |
中山大學(xué)達(dá)安基因股份有限公司 北京億森寶生物科技有限公司 (臨床用、科研用) |
0.1ml PCR 8聯(lián)管 + 光學(xué)平蓋 (隨機(jī)附送100條) | 杭州朗基科學(xué)儀器有限公司 |
迷你離心機(jī)CK-6(杭州朗基) | 一臺(tái) |
生物安全柜(B2等級(jí)) | 一臺(tái) |
渦旋振蕩器 | 一臺(tái) |
醫(yī)用冰箱 (4℃/-20℃直冷不帶自動(dòng)除霜功能) | 一臺(tái) |
低溫冰柜 (-20℃或以下) | 一臺(tái) |
可調(diào)式移液器 (10μl、200μl、1000μl) | 各一支 |
臺(tái)式高速離心機(jī) (12000轉(zhuǎn)以上) | 一臺(tái) |
干式恒溫器 | 一臺(tái) (可選,取決于所用核酸提取試劑盒的要求) |
專(zhuān)用定時(shí)器 | 一臺(tái) |
電腦Win7或Win10系統(tǒng), 4G或以上內(nèi)存,帶網(wǎng)線接口 | 一臺(tái) |
噴墨打印機(jī) | (可選,用于打印報(bào)告) |
5、檢測(cè)登革熱病毒的耗材
1.5ml/2ml 無(wú)核酸酶的離心管 | 若干 |
5ml/10ml 無(wú)核酸酶的采血管+采血針套裝 | 若干 |
0.5ml/1.5ml/2ml 雙面離心管架 | 一套 |
0.1ml/0.2ml 96 孔離心管盒 | 一套 |
0.5ml/1.5ml/10ml/50ml 四面離心管架 | 一套 |
無(wú)核酸酶的蒸餾水 | 一瓶 |
無(wú)核酸酶的生理鹽水 | 一瓶 |
無(wú)水乙醇 | 兩瓶 |
無(wú)核酸酶帶濾芯吸頭 10μl/200μl/1000μl | 各一盒 |
酒精棉球 | 若干 |
75%酒精消毒噴霧 | 一瓶 |
油性記號(hào)筆 | 一支 |
采樣拭子 | 若干 |
鑷子 | 兩把 |
無(wú)菌注射器 | 若干 |
醫(yī)用托盤(pán) | 一個(gè) |
酒精燈 | 一個(gè) |
實(shí)驗(yàn)服 | 若干套 |
一次性無(wú)粉乳膠手套 | 若干 |
一次性口罩 | 若干 |
一次性帽子 | 若干 |
鞋套 | 若干 |
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*參考資料:
360百科“2019年登革熱疫情”;
醫(yī)學(xué)百科“登革熱病毒”;
鳳凰海南官微“海南人注意!登革熱進(jìn)入高發(fā)季,出現(xiàn)這些癥狀趕緊就醫(yī)”;
北京大學(xué)第三醫(yī)院“去趟海島怎么就得了登革熱?;
南海網(wǎng)“海南省衛(wèi)健委發(fā)布登革熱防與治十問(wèn)十答”;
中國(guó)甘肅網(wǎng)“海南30例登革熱患者已解除隔離 無(wú)重癥和死亡病例”;
三亞新聞網(wǎng)“海南確定登革熱定點(diǎn)診治醫(yī)療機(jī)構(gòu)”;
生物探索“紐羅西敏隆重推出基孔肯雅熱登革熱多重PCR試劑”。